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9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。小鼠肌糖元(muscleglycogen)ELISA試劑盒廠家特點:一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;五、節(jié)省實驗經(jīng)費。小鼠肌糖元(muscleglycogen)ELISA試劑盒廠家其他產(chǎn)品信息:
犬轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒RJ19923仁捷48T/96T
大鼠P選擇素(P-Selectin)ELISA試劑盒RJ15288仁捷48T/96T
大鼠角化細胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒RJ15863仁捷48T/96T
犬鉤端螺旋體IgG(Leptospira)ELISA試劑盒RJ19689仁捷48T/96T
人細胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒RJ14250仁捷48T/96T
人生長激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒RJ13879仁捷48T/96T
人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒RJ12013仁捷48T/96T
人谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒RJ12496仁捷48T/96T
大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒RJ16563仁捷48T/96T
兔子β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白(βCat)ELISA試劑盒RJ21371仁捷48T/96T
人Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒RJ11198仁捷48T/96T
人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒RJ12619仁捷48T/96T
人風濕因子(RF)ELISA試劑盒RJ13256仁捷48T/96T
人可溶性O(shè)X40配體(sOX40L)ELISA試劑盒RJ13153仁捷48T/96T
人可溶性白介素7受體(sIL-7R)ELISA試劑盒RJ13161仁捷48T/96T
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4抗體(LRP-4)(IgG)ELISA試劑盒RJ12199仁捷48T/96T
雞神經(jīng)疾病靶標酯酶(NTE)ELISA試劑盒RJ20527仁捷48T/96T
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒RJ21417仁捷48T/96T
人叉頭框蛋白03(FoxO3)ELISA試劑盒RJ11998仁捷48T/96T
豬巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP3β)ELISA試劑盒RJ18496仁捷48T/96T
犬胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒RJ19894仁捷48T/96T
兔子金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒RJ21404仁捷48T/96T
人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)ELISA試劑盒RJ14891仁捷48T/96T
猴胃蛋白酶原II(PGⅡ)ELISA試劑盒RJ20837仁捷48T/96T
雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒RJ20370仁捷48T/96T
小鼠白細胞介素22(IL-22)ELISA試劑盒RJ16948仁捷48T/96T
人干擾素活化基因205(Ifi205)ELISA試劑盒RJ12436仁捷48T/96T
人抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒RJ13102仁捷48T/96T
大鼠17羥皮質(zhì)固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒RJ15080仁捷48T/96T
兔層粘連蛋白(LN)ELISA試劑盒RJ21014仁捷48T/96T
人精氨酸酶1(Arg-1)ELISA試劑盒RJ12871仁捷48T/96T
大鼠白細胞介素4(IL-4)ELISA試劑盒RJ15476仁捷48T/96T
人活化凝血因子Ⅻ(FⅫb)ELISA試劑盒RJ12670仁捷48T/96T
大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒RJ16276仁捷48T/96T
人乳鐵蛋白肽(Lfcin)ELISA試劑盒RJ13768仁捷48T/96T
牛E選擇素(SELE)ELISA試劑盒RJ18877仁捷48T/96T
大鼠四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒RJ16245仁捷48T/96T
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒RJ16890仁捷48T/96T
兔尿激酶型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒RJ21181仁捷48T/96T
人趨化因子CC基元配體1(CCL1)ELISA試劑盒RJ13700仁捷48T/96T
大鼠apelin 13(AP13)ELISA試劑盒RJ15158仁捷48T/96T
豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)ELISA試劑盒RJ18752仁捷48T/96T

樣本處理方法匯總表及計算解析
一、液體樣本
液體樣本處理原則:所有的液體樣本,用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),如果以后碰到其他的液體樣本,也按這個方法,納入?yún)R總表。
1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2、血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3、尿液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
4、胸腹水:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5、腦脊液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6、唾液:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
7、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
8、牛奶:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
9、蜂蜜:用無菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
10、全血:用含有抗凝劑的無菌管收集,立即輕輕搖動,來回輕輕顛倒數(shù)次,使血液和抗凝劑混勻,以防血液凝固。
二、固體樣本
固體樣本處理原則:稱取1g的固體樣本,用9g的合適緩沖液溶解,分泌蛋白可以直接離心取上清檢測,細胞內(nèi)的蛋白,要先收集細胞,再用合適方法破碎,離心取上清測試。
1、組織標本:切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。對于植物組織,不好勻漿的話,就在液氮中充分研磨;
2、細胞內(nèi)蛋白樣本
許多待測蛋白不是分泌蛋白,而是存在于細胞內(nèi)的蛋白,這個時候,要先收集細胞,洗滌干凈,再破碎細胞,離心取上清。
(1)培養(yǎng)的細胞
A、動物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融(如果反復(fù)凍融,破碎效果不好,就采用超聲波破碎),以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
B、植物細胞:用PH7.2-7.4的PBS稀釋細胞懸液,使細胞濃度達到100萬/ml左右,置于冰盒上,用超聲破碎儀,設(shè)置破碎2s,冷卻30s的方式,充分破碎細胞,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)組織的細胞
切割標本后,稱取1g組織,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工或勻漿器將標本勻漿充分。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),去除上清,再用pH7.2-7.4左右的PBS小心洗滌沉淀的細胞三遍。再用上述的細胞破碎方法破碎細胞。
3、土壤:稱取1g土壤,加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS,用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內(nèi)蛋白,要破碎細胞。
4、咽拭子:加入2g的pH7.2-7.4左右的PBS,溶解咽拭子頭部,搖勻,用鑷子取出咽拭子并擠干液體,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細收集上清。分裝一份待檢測,其余冷凍備用,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。如果是測分泌蛋白,直接取上清檢測,測試細胞內(nèi)蛋白,要破碎細胞。
5.植物標本中相關(guān)酶或蛋白的測定:(粗提。
1、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨;
2、 加入樣品體積9倍的提取液(pH 7.4 PBS緩沖液),3、 請于4度,8000rpm,離心30分鐘,取上清并暫時保存于4度待用。
三、樣本收集注意事項
1、不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
2、標本采集后盡快進行實驗,若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3、我們羅列的是通用的樣本處理方法,無法涵蓋各種樣本,對于一些特殊樣本,建議實驗人員多參考已發(fā)表的文獻,自行設(shè)計合理的樣本處理方法。
計算方法示例:繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應(yīng)OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。將樣本的OD值為X值代入方程式,所得的Y值即是我們的樣本值。(如上圖所示)