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      ELISA試劑盒專業(yè)代測(cè)牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒@最新資料

      牛山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒,牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū),牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒價(jià)格一、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理

      7月25日消息,據(jù)上海臻科對(duì)行業(yè)的市場(chǎng)透露: 牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被牛山梨醇脫氫酶(SDH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的牛山梨醇脫氫酶(SDH)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

      二、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

      1. 品種齊全、質(zhì)量可靠、靈敏度高、穩(wěn)定性好、操作簡(jiǎn)便

      2.特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

      3.重復(fù)性:板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ,板間變異系數(shù)小于15% 。

      4.同城(上海)需要代測(cè)可免費(fèi)上門(mén)取樣,享送貨上門(mén)的服務(wù)。

      5.根據(jù)客戶需求可以根據(jù)客戶的要求定制ELISA試劑盒。

      6.臻科生物可提供全方位的售前、售中、售后技術(shù)支持,為您解決實(shí)驗(yàn)過(guò)程中遇到的問(wèn)題。

       

      三、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒標(biāo)本要求

      1.  血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。2.  血漿:EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20℃-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。3.  組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mLPBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。

      注:標(biāo)本溶血會(huì)影響*后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

      四、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒組成

      名稱

      96孔配置

      48孔配置

      備注

      微孔酶標(biāo)板

      12孔×8條

      12孔×8條

      無(wú)

      標(biāo)準(zhǔn)品

      0.3mL*6

      0.3mL*6

      無(wú)

      樣本稀釋液

      6mL

      3mL

      無(wú)

      檢測(cè)抗體-HRP

      10mL

      5mL

      無(wú)

      20×洗滌緩沖液

      25mL

      15mL

      按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋

      底物A

      6mL

      3mL

      無(wú)

      底物B

      6mL

      3mL

      無(wú)

      終止液

      6mL

      3mL

      無(wú)

      封板膜

      2

      2

      無(wú)

      說(shuō)明書(shū)

      1

      1

      無(wú)

      自封袋

      1個(gè)

      1個(gè)

      無(wú)

      五、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作流程

      1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2.  設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

      3.  樣本孔待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

      4.  除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min

      5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

      6.  每孔加入底物A、B50μL37℃避光孵育15min。

      7.  每孔加入終止液50μL15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

      六、牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

      1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

      2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

      3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

      4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

      5. 封板膜只限一次性使用,避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

      6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。底物請(qǐng)避光保存

      7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

      任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

      七、關(guān)于牛山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒特別聲明

      公司長(zhǎng)期與各大高校、醫(yī)院及權(quán)威科研單位保持著良好的合作關(guān)系,公司的產(chǎn)品質(zhì)量及服務(wù)態(tài)度得到了他們的一致認(rèn)可。臻科生物本著客戶至上的原則為客戶提供高質(zhì)量高品質(zhì)的產(chǎn)品,公司承諾如有任何質(zhì)量的問(wèn)題免費(fèi)包退換(非人為因素造成的)?筛鶕(jù)客戶要求定制ELISA試劑盒,并承諾直到客戶滿意為止。如您想要了解更多技術(shù)參數(shù)可以直接聯(lián)系我司客服人員。

      該公司產(chǎn)品分類(lèi): 兔ELISA試劑盒 犬ELISA試劑盒 其他種屬 馬ELISA試劑盒 鵝ELISA試劑盒 鴨ELSIA試劑盒 豬ELISA試劑盒 倉(cāng)鼠ELISA試劑盒 大鼠ELISA試劑盒 人ELISA試劑盒 小鼠ELISA試劑盒 生化試劑盒 基因組和質(zhì)粒提取試劑盒 植物ELISA試劑盒 魚(yú)ELISA試劑盒 猴子ELISA試劑盒 牛ELISA試劑盒 羊ELISA試劑盒 豚鼠ELISA試劑盒 雞ELISA試劑盒

      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒

      人山梨醇脫氫酶(SDH)elisa試劑盒上海潤(rùn)裕生物科技有限公司等科研產(chǎn)品,我公司ELISA試劑盒和免疫組化試劑盒產(chǎn)品質(zhì)量可靠,ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫分析試劑盒)專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)及售后指導(dǎo)。所以生物試劑產(chǎn)品用于科研實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域,如有需要請(qǐng)直接來(lái)電或給我們留言(半個(gè)工作日內(nèi)給您回復(fù))。

      歡迎來(lái)電索取產(chǎn)品報(bào)價(jià),產(chǎn)品說(shuō)明書(shū),潤(rùn)裕生物品質(zhì)服務(wù),真誠(chéng)相伴!

      主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

      性狀:盒裝液體

      ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

      ELISA試劑盒種屬齊全:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。

      產(chǎn)品運(yùn)輸方面:部分現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨

      2、檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。

      3、服務(wù)承諾:工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo),提供來(lái)樣檢測(cè)及免費(fèi)代測(cè)服務(wù),保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。

      4、研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。

      如果人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒所檢測(cè)的樣本不是連續(xù)的,所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測(cè)前要有一個(gè)完整的計(jì)劃,如標(biāo)本編號(hào)、所測(cè)項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭,避免交叉污染。

      主要分為以下系列:

      1、細(xì)胞因子檢測(cè)試劑盒

      2、內(nèi)分泌檢測(cè)試劑盒

      3、肝纖維化檢測(cè)試劑盒

      4、心肌梗塞檢測(cè)試劑盒

      5、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)試劑盒

      6、自身免疫檢測(cè)試劑盒

      7、優(yōu)生優(yōu)育檢測(cè)試劑盒

      8、傳染病檢測(cè)試劑盒等等。

      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作步驟

      方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:

      1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為110μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。

      2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

      3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.51小時(shí),洗滌。

      4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,371030分鐘。

      5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

      6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。

      方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:

      用包被緩沖液將已知抗原稀釋至110μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的45、6。

      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

      1. 正式試驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽(yáng)性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說(shuō)明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

      2. 在人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的,其中包括:

      (1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

      (2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH9.09.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用41824小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.010μg/ml)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時(shí),觀察陽(yáng)性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來(lái)說(shuō)通常為110μg/ml。

      (3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

      (4) 酶的底物及供氫體的選擇:對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無(wú)色。有些供氫體(OPD)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMBABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入。

      凡購(gòu)人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒等潤(rùn)裕生物ELISA試劑盒,標(biāo)準(zhǔn)品等試劑產(chǎn)品,公司專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)全程提供免費(fèi)技術(shù)支持與指導(dǎo),只需來(lái)樣即可為您免費(fèi)代測(cè),可測(cè)定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量或者活性表達(dá)。潤(rùn)裕生物專業(yè)為您提供ELISA試劑盒價(jià)格,規(guī)格,用途,說(shuō)明書(shū)等操作說(shuō)明詳情可來(lái)電咨詢,歡迎訂購(gòu)。

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      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒

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      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒產(chǎn)品信息

      英文名稱:Human sorbitol dehydrogenase,SDH ELISA Kit

      產(chǎn)品貨號(hào):SBJ-H1226

      品牌:森貝伽

      產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T

      保存:2-8℃,避光保存

      庫(kù)存狀態(tài):現(xiàn)貨供應(yīng)

      有效期:六個(gè)月

      注:僅用于科研,不得用于臨床診斷

       

      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法: 

      1)血清-----操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

      2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。

      3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

      4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液

      5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

       

      人山梨醇脫氫酶(SDH)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):

      1.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

      2.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。3.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。

      4.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。5.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

      6.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。7.加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

      8.按照試劑盒說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

      9.底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

       

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