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本廠開發(fā)研制生產(chǎn)的廢舊蓄電池智能修復(fù)檢測系統(tǒng)可以修復(fù)手機(jī)、摩托車、電動自行車、電動三輪車、電動摩托車、電動汽車及汽車、船舶、火車、UPS等車用電瓶及各種工業(yè)用電池。聯(lián)系人：艾薇 QQ:873959974
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人生長分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)ELISA試劑盒
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使君子探針法PCR鑒定試劑盒
貨號： XY999237P15
使君子探針法PCR鑒定試劑盒Fructus quisqualis產(chǎn)品及特點(diǎn)：它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)使君子高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會跟其他病毒 DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 PCR 反應(yīng)。
6. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分：
| 編號 | 成分 | 規(guī)格 |
| 試劑一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL（本色蓋） |
| 試劑二 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL（黃蓋） |
| 試劑三 | 使君子qPCR引物混合液 | 100 μL（白蓋） |
| 試劑四 | 使君子qPCR探針 | 50 μL（棕色管） |
| 試劑五 | 使君子探針法qPCR陽性對照(1×10E8拷貝/μL) | 50 μL（紅蓋） |
| 使用手冊 | 1 份 |
運(yùn)輸及保存： 低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個月。
自備試劑： 樣品 RNA。
使用方法 一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。
由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 片段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備：
7. 如果有 N 個樣品，設(shè)置 N+2 個提取，多出的一個是 PC（樣品制備陽性對照），一個是 NC（樣品制備陰性對照）？梢杂 10μL 陽性對照的 10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為 NC。
8. 用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù) DNA 提取試劑盒兼容。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）：
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于 PCR 陽性對照（用第 4 號管的陽性對照稀釋液做模板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）：
| 成份 | N+2 個樣品管 | PCR 陰性對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品管（2-7管） |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10μL | 10μL | 各10μL |
| 使君子qPCR探針 | 1μL | 1μL | 各1μL |
| 使君子探針法qPCR引物混合液 | 2μL | 2μL | 各2μL |
| N+2個待測DNA模板 | 7μL | -- | -- |
| 超純水 | -- | 7μL | -- |
| 第7步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液（2-7號） | -- | -- | 各7μL（2號樣到2號管，3號樣到3號管…） |
11.蓋上蓋子后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行PCR：
| 過程 | 溫度 | 時間 |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 3 min |
| PCR 反應(yīng)（40 個循環(huán)） | 95℃ | 15 sec |
| 60℃ | 1 min（采集FAM通道的熒光信號） |
四、數(shù)據(jù)處理：
12. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 RNA濃度的 log 值，再推算出其濃度。
13. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照 Ct 必須大于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該小于或等于 30。對待測樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小于或等于 35 則為陽性。如果在 35-40 之間，則重復(fù)一次。若重復(fù)結(jié)果 Ct值小于 40，擴(kuò)增曲線有明顯起峰，該樣本判斷為陽性，否則為陰性。
僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動物的治療等任何其他用途，不為任何個人提供產(chǎn)品和服務(wù)。
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